银杏叶黄酮醇甙的树脂法纯化(d101树脂与层析用聚酰胺树脂混合使用)|上海摩速科学器材有限公司-凯发官方首页
国内外的银杏叶制剂有tanakan, tebonin, forte,ginkgogink,craton, duophan, 天保宁，百路达，银可络等。德国 schwabe公司和法国ipsen公司生产的银杏叶制剂是有具体规格标准的银杏叶提取物gbe761，其中黄酮醇甙（1）含量≥24%，银杏内酯（2）≥6%，银杏酸≤100ppm。国内制药行业所用gbe的质量，一般（1）≥24%，（2）为2%--3%。gbe在食品饮料，化妆品等方面应用的质量基本要求为（1）≥20%，原花色素≤10%，烷基酚≤10ppm, （2）的指标因具体品种要求而定。
目前，国内多采用青叶为原料制备，工艺上采用溶剂法和树脂法。前法是通过有机溶剂（乙醇，丙酮，甲醇等）浸泡叶子，过滤，水析，浓缩为银杏浸膏，产率约12%---15%，（1）的含量3%--5%，再经液-液萃取（二氯甲烷，氯仿，乙醚，丁酮，乙酸乙酯等），产率约0.8%--1.0%, (1)的含量15%--18%。树脂法采用大孔吸附树脂，聚酰胺等对（1）进行吸附和解附，产率1.0%--3.0%, 含量10%--28%。
提取
取黄叶500g, 破碎至大小0.5--1.5cm, 加45%乙醇水溶液，叶重(g)与溶剂体积比(ml)为1:6--1:8, 回流2h。共提取两次，合并提取液5.4l。回收乙醇，浓缩液用水稀释至3l。取样进行hplc分析。固溶物提取率为20.9%, 黄酮醇甙含量为2.12%, 提取率为方便用户94%。
絮凝反应
絮凝剂用量为40--50ml, 加入到3l提取液中，搅拌，产生大量絮状沉淀。离心过滤，滤液为澄清透明液体，固溶物为15.6%，（1）含量 为2.57%.
ph沉降
用0.5mol/l naoh溶液，调节上述澄清液ph至8.5---9.0, 产生絮状沉淀。离心过滤，滤液用0.5mol/l hcl 溶液调ph至6--7。其固溶物为14.2%, 含量为2.54%。
树脂吸附
取d101树脂和聚酰胺树脂约400g, 体积比为1:1, 体积为1000ml, 混匀装柱。将经絮凝，ph处理的澄清液约3l, 上混合固定床。树脂的吸附量约为3.0g/100ml。以3--4倍柱体积的水洗，然后以70%乙醇解吸，经浓缩，干燥得到产品6.4g, 相对叶重得率为1.28%, (1)含量为25.1%.
讨论
1 提取剂的选择
目前，有丙酮-水，乙醇-水和水等几种溶剂作为提取剂。以丙酮提取时，叶绿素等含量高；水提取或低浓度乙醇提取时，水溶性杂质多，（1）提取率低；高浓度乙醇提取时，烷基酚，原花色素等醇溶性物质含量高。经优选，用45%乙醇水溶液提取，所得产品有害成份含量少，（1）的提取率在90%以上。
2 絮凝剂
絮凝剂为合成的高分子聚合物，能使蛋白质变性，产生沉淀。沉淀呈棉絮状，因而使（1）等被包裹而引起损失。添加1%--2%的絮凝剂，能使溶液中的固溶物下降5%--6%, 黄酮损失率为9.48%。
3 ph值调节
溶液ph调至8.5--9.0时，主要沉降原花色素。原花色素与(1)的紫外吸收波长相近，因而比色法分析（1）含量偏高。hplc法采用酸水解，c18柱展开，能避免原花色素的干扰。原花色素对人体有一定的毒性，因而必须在gbe产品中控制其含量。经ph酸碱处理，溶液中的固溶物下降约1.5%, (1)略有损失。
4 树脂的选择
d101和聚酰胺树脂混合使用为国内**。d101等大孔吸附树脂对黄酮吸附率为6--7mg/lg树脂，对固溶物的吸附率为2.2--2.5g/100ml, 因而对（1）选择性差，得率为2.5%---3.0%, (1)含量 10%--16%。相反，聚酰胺树脂对（1）吸附的选择性高，对（1）吸附率为15--20mg/lg树脂。产品得率低，一般小于1%，但（1）含量高达24%--30%。针对两种树脂的特点选用一定体积比（1:1)的混合树脂，不仅能改善选择性，而且产品得率提高1.3%, 黄酮醇甙纯度大于24%.
5 树脂再生
树脂再生的好坏直接影响其吸附能力。可选用0.4--0.6mol/l naoh溶液和hcl溶液分别对混合树脂进行酸碱处理，*后以水冲洗至中性。