转帖层析聚酰胺用户精华博文-凯发官方首页

聚酰胺一定要预处理，起码要 用乙醇泡过，柱子底下要垫脱脂棉，能快一些
我的聚酰胺流速超快！估计一个是粒度的问题，二是你的样品问题。我先放了石头在*底层，再放脱脂棉，再装聚酰胺，流速非常快。
产品介绍：
质量指标：分子量：14000～17000比表面：5～10m2/g
ph值: 6~7
产品价格：30~60目 180元/kg60～100目 240元/kg100目以上 300元/kg
溶解度：溶于浓盐酸，甲酸，微溶于醋酸，苯酚等溶剂，不溶于水，甲醇，乙醇，丙酮，乙醚，氯仿和苯等常用有机溶剂，对碱较稳定，对酸的稳定性较差，尤其是无机酸，在温度高时更敏感。
吸附原理：
聚酰胺是由酰胺键聚合形成的高分子化合物。其酰胺基可与羟基酚类，酸类，醌类，硝基等化合物以氢键形成结合而被吸附，其脂肪长链可作为分配层析的载体。聚酰胺在含水系统中层析时，聚酰胺作为非极性固定相，其层析行为反向柱层析；在非水溶剂系统时，聚酰胺作为分配层析的载体，其层析行为为正向柱层析。
应用范围：
聚酰胺特别适应于多元酚类化合物的分离，如黄酮、醌类、酚酸、含羰基化合物、羧基化合物等。
例如：葛根素中提取葛根黄酮、茶叶提取茶多酚、 人参中提取人参皂苷、银杏叶中提取银杏黄酮、甘草中提取甘草皂苷、甜叶菊中提取甜菊苷、发酵液中提取维生素和***等成份
对鞣质吸附强，用于将植物粗提物中的鞣质除去。
前处理：
新买的聚酰胺
取聚酰胺以90-95%乙醇浸泡，不断搅拌，除去气泡后装入柱中。用3-4倍体积的90-95%乙醇洗脱，洗至洗脱液透明并在蒸干后无残渣（或极少残渣）。再依次用2-2.5倍体积5%naoh水溶液、1倍体积的蒸馏水、2-2.5倍体积的10%醋酸水溶液洗脱，*后用蒸馏水洗脱至ph中性，备用。
用过的聚酰胺
一般用5%naoh水溶液洗脱，洗至naoh水溶液颜色极淡为止。有时因某些鞣质与聚酰胺又不可逆吸附，用naoh水溶液很难洗脱，可用5%naoh在柱中浸泡，每天将柱中的naoh水溶液放出一次，并加入新的5%naoh水溶液，这样浸泡一周后，鞣质可基本洗脱完。然后用蒸馏水洗脱至ph8-9，再用2倍量的10%醋酸水溶液洗脱，*后蒸馏水洗脱至ph中性，重复使用。
聚酰胺吸附法的操作：
1、装柱：一般将颗粒状聚酰胺混悬于水中，使其充分膨胀，然后装柱，让聚酰胺自由沉降；当用非极性溶剂系统时候，则用组分中低级性的溶剂装柱。
2、稀释适当浓度上样：一般每100ml聚酰胺上样1.5-2.5g，样品先用洗脱溶剂溶解，浓度为20%-30%。水溶性化合物直接上样；若提取物水溶性不好，则用挥发性有机溶媒溶解、拌适量聚酰胺、挥干或减压蒸干、干法装入柱顶。
3、水洗：先用水洗脱。
4、醇洗：在水中递增乙醇浓度至浓乙醇溶液，或氯仿、氯仿-甲醇，递增甲醇至纯甲醇洗脱。若仍有物质未被洗脱，可用稀氨水或稀甲酰胺溶液洗脱，分段收集。
5、找到*佳吸附比：先小量试验找到*佳吸附比。
6、放大：根据小试及*佳吸附比进行放大试验。
7、聚酰胺的回收：使用过的聚酰胺一般用5%氢氧化钠溶液洗涤，然后水洗，再用10%醋酸液洗，然后用蒸馏水洗至中性，即可。

对于分离黄酮类化合物来说，聚酰胺是较理想的吸附剂。其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中的羟基数目与位置。一般有以下规律：
1、苷元相同，连接糖越多，吸附力越大，流出越慢。
2、母核上增加羟基，洗脱速度相应减缓。
3、对位、间位酚羟基使吸附能力 〉邻位酚羟基。
4、不同类型的黄酮的流出顺序一般是：异黄酮 〉二氢黄酮醇〉黄酮 〉黄酮醇。
5、分子中芳香核、共轭双键多者则吸附力强，晚出柱。
6、若形成分子内氢键则吸附力减弱。

含水系统洗脱能力：碱液>甲醇>水
溶剂洗脱能力与溶剂极性相关可使化合物得到较好的分离。
选择系统时，可以将样品加入上述溶剂系统中，观察样品在聚酰胺薄膜的层析行为，然后确定溶剂系统。
聚酰胺与大孔树脂的区别：
吸附原理不同：大孔树脂是物理吸附原理；聚酰胺是化学吸附原理，氢键吸附，用于酚类、黄酮类、醌类成分的分离。
大孔树脂的分离效果没有聚酰胺好。若是粗粉可以用大孔树脂进行分段，聚酰胺可用于黄酮类成分的细分或纯化。
聚酰胺树脂可以使用其干柱层析功能，在分离黄酮的过程中作用也是很大的，而大孔树脂则没有此功能。
聚酰胺树脂可以首先用聚酰胺薄膜展开系统，而大孔树脂没有薄层
树脂进行新药研发，其新药若用大孔树脂制备，必须有打孔的残留检查，而聚酰胺目前还没有正式的文件要检查其残留
聚酰胺上样时，其样品中的鞣质会对主子产生死吸附，大孔出现这种现象很少
大孔的可选择类型比聚酰胺多，而且还增加了许多键合类型，如asd型，其键合了酰胺键，增加了其选择性。
聚酰胺的不足及凯发官方首页的解决方案：
聚酰胺柱层析的不足：
比如机械强度不大，
粒度不均匀，分离时流速较慢
一些小分子杂质混入的问题
采用的凯发官方首页的解决方案有：
1.装柱前先过筛
2.装柱时用5%甲醇或10%盐酸预先除去小分子杂质
3.与硅藻土混合制粒以增加机械强度。